由于肝可分泌膽汁,可合成多種蛋白質和脂類物質,而肝細胞又能夠進行物質的合成、分解、轉化、貯存,又參與著糖、脂類、蛋白質三大基本物質的代謝。此次實驗用戶選擇對其肝組織細胞樣品進行懸液制備實驗處理。
根據用戶的實驗需求,此次實驗選用上海凈信旗下科研者的單細胞懸液制備儀JX-CKSM-4WK來對實驗樣品肝組織進行單細胞懸液制備。
肝組織樣品細胞懸液制備的實驗操作過程:
01.打開儀器電源開關,將儀器界面中的模塊加熱和熱板加熱點開,將其兩者先預熱恒溫到37℃左右。
02.將穿刺成長條的樣本剪一部分下來直接放入凈信2ml研磨管中。
03.加入凈信消化酶,旋上蓋子,上下微微晃動研磨管將其組織和消化酶均勻混合。
04.將混合好的研磨管放入加熱模塊中,將其研磨管中的樣品和試劑恒溫至37℃后,再將研磨管放入熱板中,蓋上蓋子。
05.啟動Program 2(25min)
06.待儀器程序時間到之后出現滴滴的提示音,則打開儀器蓋子,取出樣品管
07.將樣品管中的液體和剩下的組織一起倒入過濾管中,然后再加入終止液(避免消化酶將液體中的單細胞也消化完了),得到的液體,即單細胞懸液。
肝組織樣品細胞懸液制備實驗效果的對比:
實驗操作注意事項:
單細胞技術已經廣泛應用于腫瘤,免疫,發(fā)育生物學,神經科學,細胞治療,藥物研發(fā)及動植物研究中。但并不是所有的組織都適用于單細胞RNA測序,現階段單細胞RNA測序研究是一個較大的挑戰(zhàn)仍是如何獲得高質量的單細胞懸浮液。
科研者單細胞懸液制備儀具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。帶加熱功能,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài),細胞得率高達90%,方便了對真核生物進行單細胞核RNA測序。